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Dengue (Teste Molecular RT-PCR) - Sangue

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Definição: É uma doença febril aguda, considerada uma arbovirose endêmica, com principal via de transmissão constituída pela picada da fêmea do mosquito Aedes aegypt e do Aedes albopictus .

Sinônimos: Dengue (RT-PCR sangue); Dengue (Teste Molecular - Sangue); PCR para Dengue (sangue); DENV (RT-PCR sangue).

É um vírus de material genético RNA, membro da família Flaviviridae , gênero Flavivirus , que apresenta quatro diferentes sorotipos (DENV1, 2, 3 e 4). Importante observar que a infecção por um sorotipo não confere imunidade duradoura aos outros, mas apenas parcial e temporariamente.

A dengue apresenta um período de incubação que pode oscilar entre 3 a 14 dias, cuja apresentação clínica é muito variável, desde quadros assintomáticos/oligossintomáticos até formas graves da doença.

A detecção do material genético do vírus da dengue por técnicas moleculares apresenta grande sensibilidade e especificidade para o diagnóstico na fase aguda da doença, antes mesmo da soroconversão (primeiros 5 dias do início dos sintomas).

Por meio da reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa (RT-PCR), ou pela RT-PCR em tempo real, partículas do RNA viral podem ser amplificadas e detectadas no sangue (usualmente), assim como em outros materiais biológicos (ex.: líquido cefalorraquidiano, fragmentos de vísceras).

A pesquisa de anticorpos IgG, IgM, bem como a detecção do antígeno NS1, é a técnica mais amplamente disponível para o diagnóstico.

O isolamento viral com a identificação do sorotipo da dengue (DENV1, 2, 3 e 4) responsável pela infecção é um exame que também está disponível em alguns centros de referência, e que pode ser solicitado no período inicial da infecção.

Em alguns laboratórios de referência, existe a disponibilidade de um painel, por meio de técnicas moleculares, para a detecção e diferenciação simultânea (em uma mesma amostra) entre os vírus da dengue, chikungunya e zika.

    Indicação:
  • Diagnóstico da infecção aguda;
  • Pacientes com o antígeno NS1 e/ou anticorpo IgM negativos, porém com suspeita clínico-epidemiológica e evolução grave;
  • Diagnóstico diferencial de infecções agudas causadas por outras arboviroses (ex.: zika, chikungunya, febre amarela) e outras doenças febris.

Como solicitar: Dengue (Teste Molecular RT-PCR) - Sangue.

  • Orientações ao paciente: n ão é necessário preparo específico;
  • Tubo para soro (tampa vermelha/amarela). Coletar, preferencialmente, até o 5º dia dos sintomas, na fase virêmica. Após a retração do coágulo e centrifugação da amostra, aliquotar o soro em um tubo de transporte, congelando-o imediatamente;
  • Material: s angue (usualmente). No caso da opção por outros materiais biológicos, entrar em contato com o laboratório clínico para informações específicas;
  • Volume recomendável: 1,0 mL.

Não detectado.

Amostras descongeladas podem interferir no resultado do exame.

A manipulação inadequada das amostras pode gerar resultados falso-positivos.

Uma coleta muito precoce, principalmente nas primeiras 24-48 horas do início dos sintomas, pode gerar resultados falso-negativos.

Resultados falso-positivos e falso-negativos, embora raros, podem ocorrer, o que é uma característica do método.

A coleta da amostra após a fase virêmica, especialmente após o 5º-7º dia de sintomas, pode impossibilitar a detecção do material genético.

Seus resultados devem ser correlacionados com o quadro clínico, história epidemiológica e outros exames complementares.

Detectado: Infecção aguda (até a primeira semana de evolução, principalmente até o 5º dia).

Não detectado: Indivíduos não infectados; infecção recente/tardia (principalmente após a primeira semana de evolução); pacientes com história de contato prévio.

Autoria principal: Pedro Serrão Morales (Patologia Clínica e Medicina Laboratorial).

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