Fragilidade Osmótica Eritrocitária
Definição: Teste que tem por objetivo avaliar o grau de fragilidade/resistência das membranas eritrocitárias à hemólise quando submetidas a diferentes diluições de solução salina, comparando-as com uma amostra controle.
Sinônimos:
Fragilidade osmótica das hemácias, fragilidade globular eritrocitária, teste de fragilidade osmótica eritrocitária, pesquisa de fragilidade osmótica eritrocitária, fragilidade eritrocitária, fragilidade das células vermelhas, fragilidade dos glóbulos vermelhos.
Fisiologicamente, os eritrócitos (assim como qualquer outro tipo de célula), quando expostos a soluções hipertônicas (muito concentradas), perdem água em excesso (desidratam) e sofrem um processo de crenação (encolhem).
Em contrapartida, quando submetidos a soluções hipotônicas, absorvem água e dilatam-se progressivamente, à medida que as concentrações da solução salina vão decaindo. A depender do nível da hipotonia, eles podem se romper (hemolisar).
Os eritrócitos são adicionados a soluções salinas graduadas, de concentrações decrescentes. Classicamente, avalia-se, por meio de espectrometria óptica, a porcentagem de hemólise encontrada em cada diluição, podendo ser plotada em um gráfico/curva para melhor visualização e interpretação dos resultados.
Tradicionalmente, o teste da fragilidade osmótica eritrocitária é utilizado para o auxílio diagnóstico da esferocitose eritrocitária, uma doença hemolítica familiar cujo quadro clínico é caracterizado por anemia, icterícia intermitente e esplenomegalia de intensidades variáveis. Nessa condição, a fragilidade osmótica está aumentada, apresentando um início da hemólise mais próximo às concentrações fisiológicas de NaCl (desvio da curva para a direita).
Existem adaptações ao teste clássico (ex.: fragilidade osmótica por citometria de fluxo) e outros exames laboratoriais (ex.: teste de ligação de eosina 5-maleimida [EMA]) mais acurados para o diagnóstico da esferocitose hereditária.
-
Indicações:
- Auxílio diagnóstico de esferocitose hereditária;
- Avaliação de anemias hemolíticas, hemoglobinopatias e talassemias.
Como solicitar: Fragilidade osmótica eritrocitária.
- Orientações ao paciente: não há a necessidade de preparo específico;
-
Tubo para sangue total (tampa roxa – EDTA). Deve ser analisado, de preferência, em até 24 horas após a coleta. Pode-se incubar a amostra a 37
o
C por 18-24 horas antes da realização do teste, a fim de melhorar a sua sensibilidade;
-
Material: sangue;
-
Volume recomendável: 2 mL.
Figura 1.
Tubo para sangue total – tampa roxa (EDTA)
Início da hemólise: Solução salina (NaCl) a 0,45%.
Hemólise completa: Solução salina (NaCl) a 0,35%.
- Atenção! Não há consenso sobre os valores de referência para a fragilidade osmótica eritrocitária, sendo possível haver variações entre os laboratórios clínicos.
Amostras hemolisadas e/ou coaguladas inviabilizam a realização do teste.
Apesar de, tradicionalmente, ser utilizado para avaliação diagnóstica da esferocitose hereditária, esse teste não é específico para essa finalidade.
A fim de mitigar a possibilidade de resultados falso negativos, pode-se incubar a amostra a 37
o
C por 18-24 horas antes da realização do teste, melhorando, assim, a sua sensibilidade.
É um teste muito laborioso e que demanda tempo.
Existem adaptações ao teste clássico (ex.: fragilidade osmótica por citometria de fluxo) e outros exames laboratoriais (ex.: teste de ligação de eosina 5-maleimida [EMA]) mais acurados para o diagnóstico da esferocitose hereditária.
-
Aumento da fragilidade osmótica:
- Esferocitose hereditária;
- Esferocitose autoimune;
- Piropoiquilocitose hereditária;
- Estomatocitose hereditária;
- Grandes queimaduras;
- Algumas causas de envenenamentos;
- Malária;
- Esclerose múltipla.
-
Diminuição da fragilidade osmótica:
- Hemoglobinopatias;
- Talassemias;
- Anemia ferropriva;
- Xerocitose hereditária.
Autoria principal: Pedro Serrão Morales (Patologia Clínica e Medicina Laboratorial).
Chueh HW, Hwang SM, Shim YJ, et al. Korean RBC Disorder Working Party. Korean clinical practice guidelines for the diagnosis of hereditary hemolytic anemia. Blood Res. 2022; 57(2):86-94.
Guerra CCC, Ferreira CES, Mangueira CLP. Clínica e Laboratório Prof. Dr. Celso Carlos de Campos Guerra. 1a ed. São Paulo: Sarvier, 2011.
Jacobs DS, DeMott WR, Oxley DK. Jacobs & DeMott laboratory test handbook with key word index. 5th ed. Hudson: Lexi-Comp Inc., 2001.
Kanaan S. Laboratório com interpretações clínicas. 1a ed. Rio de Janeiro: Atheneu, 2019.
McPherson RA, Pincus MR. Henry's clinical diagnosis and management by laboratory methods. 23rd ed. St. Louis: Elsevier, 2017.
Pagana KD, Pagana TJ, Pagana TN. Mosby’s diagnostic & laboratory test reference. 14th ed. St. Louis: Elsevier, 2019.
Shahal-Zimra Y, Nosgorodcky Y, Eshel E, et al. Comparison of a modified flow cytometry osmotic fragility test with the classical method for the diagnosis of hereditary spherocytosis. Cytometry B Clin Cytom. 2022; 102(5):377-383.
Walski T, Chludzińska L, Komorowska M, et al. Individual osmotic fragility distribution: a new parameter for determination of the osmotic properties of human red blood cells. Biomed Res Int. 2014; 2014:162102.
Yamamoto A, Saito N, Yamauchi Y, et al. Flow Cytometric Analysis of Red Blood Cell Osmotic Fragility. J Lab Autom. 2014; 19(5):483-7.